酵母蛋白小量提取試劑盒 NobleRyder P1140
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酵母蛋白小量提取試劑盒 NobleRyder P1140
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酵母蛋白小量提取試劑盒
一,試劑盒組份
組份 | (50T) | (100T) |
酵母裂解液 | 50mL | 100mL |
玻璃珠 | 3g | 6g |
PMSF(100X) | 1ml | 1ml |
β-巰基乙醇 | 1ml | 1ml |
二,說明
酵母蛋白小量提取試劑盒用于從酵母細胞中分提取可溶性各種蛋白。提取的蛋白可用于各種常規(guī)實驗。如PAGE,Western,免疫沉淀(immunol precipitation,IP)和免疫共沉淀(co-IP)。酵母裂解液中不含任何去污劑,可用各種方法測定蛋白含量。
三,操作步驟
1. 酵母常規(guī)培養(yǎng)。
2. 離心收集酵母。大概50-100ul的積壓體積。*棄上清。
3. 加入酵母裂解液,吹打重重懸。再次離心,棄上清(此步的目的是將酵母洗一下,也可以省掉此步)。
4. 在酵母菌中,再加入0.5ml裂解液,加入5ul PMSF,5ulβ-巰基乙醇(在通風處操作)。加入50mg左右的玻璃珠,預冷,渦流10min(每渦流1min,可以冰上冷卻1min)。
5. 離心,取上清。進行下一步實驗或者-70℃儲存。
四,注意事項
1,不同的酵母可能須渦流時間不同,可根據實際情況延長或者縮短時間。(比如蛋白濃度高低,蛋白降解情況等。)
2,如果一個月內能夠用完,可將β-巰基乙醇按照百分之一的量一次性全部加入酵母裂解液中。2-8度保存。
3,因為是采用物理方法破解酵母壁,所以對于酶等一些易失活蛋白可能并不適合。
4,為了你的實驗安全,請戴手套操作。并注意通風。
北京諾博萊德科技有限公司位于北京市海淀區(qū),是一家專業(yè)從事生化試劑、分子生物學試劑、實驗耗材及實驗儀器研發(fā)、銷售、服務為一體的生物科技公司,公司主要經營的進口品牌包括Qiagen, Omega, Sigma, Invitrogen, Roche, Abcam, Santa cruz, Fermantas(MBI), NEB, BD, Peprotech, Abnova, R&D systerms, GE, Biovision, Millipore, Amresco, Merck, CST, Axygen, Corning, NUNC, Thermo fihser, Eppendorf等;產品涉及化工原料、生化試劑、分子克隆相關試劑、細胞培養(yǎng)及檢測常用試劑、實驗室常用耗材及儀器。
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