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NobleRyder 雙縮脲蛋白定量試劑盒

  • 型   號:P2804
  • 價(jià)   格:
  • 更新時(shí)間:2024-09-26
  • 廠家性質(zhì):經(jīng)銷商

NobleRyder 雙縮脲蛋白定量試劑盒
NobleRyder 雙縮脲蛋白定量試劑盒 P2804

       雙縮脲蛋白定量試劑盒


產(chǎn)品簡介:

雙縮脲是一種用于分析蛋白質(zhì)的方法,雙縮脲反應(yīng)的原理是在呈藍(lán)色的堿性硫酸銅溶液存在的情況下,銅離子與肽鍵形成有色螯合的銅復(fù)合物,呈紫色。所產(chǎn)生的顏色密度與參與反應(yīng)肽鍵數(shù)成比例??赏ㄟ^比色法分析濃度,在紫外可見光譜中的波長為540nm。雙縮脲法測定蛋白濃度兼容性亦很好,不受大部分樣本中其他成分的影響,但易受銅離子螯合劑影響,另外,對于血清總蛋白的雙縮脲分析,膽紅su、脂類、血紅蛋白、葡聚糖具有一定干擾作用。雙縮脲法在10~160mg/ml濃度范圍內(nèi)有較好的線性關(guān)系。

NobleRyder 雙縮脲蛋白定量試劑盒 

產(chǎn)品組成:

                     編號

名稱

P2804

500T

P2804

1000T

Storage

試劑(A): 雙縮脲試劑

100ml

200ml

RT

試劑(B): 蛋白標(biāo)準(zhǔn)(BSA)

160mg

160mg

RT

試劑(C): 蛋白標(biāo)準(zhǔn)配制液

1.5ml

3ml

RT

使用說明書

1份

 

自備材料:

1.酶標(biāo)儀或分光光度計(jì)

2.96孔板或離心管

 

操作步驟(僅供參考)

1.取1ml蛋白標(biāo)準(zhǔn)配制液或稀釋液加入到蛋白標(biāo)準(zhǔn)(BSA)中,充分溶解后配制成160mg/ml的蛋白標(biāo)準(zhǔn)溶液,配制后可立即使用,溶解后的蛋白標(biāo)準(zhǔn)溶液應(yīng)-20℃保存。特別提示:待測蛋白溶解于什么樣的稀釋液中,蛋白標(biāo)準(zhǔn)也宜溶解于什么樣的稀釋液中。
2.例如待測蛋白溶解于蔗糖中,亦取蛋白標(biāo)準(zhǔn)溶解于蔗糖中。一般也可以用0.9%NaCl或PBS作為溶解BSA稀釋液。

3.將標(biāo)準(zhǔn)品按0, 1, 2, 4, 8, 12, 16, 20μl加到96孔板的標(biāo)準(zhǔn)品孔,加稀釋液補(bǔ)足至20μl。

4.加適當(dāng)體積待測蛋白樣本到96孔板的樣品孔中。如果標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液與溶解待測蛋白樣本的溶液不同,應(yīng)在待測蛋白樣本孔中加入20μl稀釋液;如果標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液與溶解待測蛋白樣本的溶液相同,無需在待測蛋白樣本孔中加入20μl稀釋液。

5.各孔加入200μl雙縮脲試劑, 室溫放置10~15min。

6.測定540nm波長處的吸光值,如無540nm,520~562nm之間的波長也可。

7.根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算出樣品的蛋白濃度。


注意事項(xiàng):

1、 蛋白標(biāo)準(zhǔn)(BSA)粉末溶解于蛋白標(biāo)準(zhǔn)配制液后,即獲得蛋白標(biāo)準(zhǔn)原液,該原液中含有防腐劑,不影響后續(xù)檢測,該蛋白標(biāo)準(zhǔn)原液-20℃長期保存。

2、 待測蛋白溶解于什么樣的稀釋液中,蛋白標(biāo)準(zhǔn)也宜溶解于什么樣的稀釋液中,否者待測蛋白與蛋白標(biāo)準(zhǔn)中所含非蛋白成分不一致,有可能導(dǎo)致測定不準(zhǔn)確。

3、 待測蛋白和蛋白標(biāo)準(zhǔn)加入雙縮脲試劑后,如果發(fā)現(xiàn)檢測效果不佳,可以室溫放置1h或60℃放置15min,顏色會(huì)隨著時(shí)間的延長不斷加深。顯色反應(yīng)也會(huì)隨溫度升高而加快。如果濃度較低,可以適當(dāng)延長孵育時(shí)間或在較高溫度下孵育。

4、 測定標(biāo)準(zhǔn)曲線時(shí)發(fā)現(xiàn)隨著標(biāo)準(zhǔn)品濃度的增加吸光度或顏色沒有明顯變化,可能的原因是樣品中含有銅離子螯合劑。

5、 建議每次測定時(shí)都做標(biāo)準(zhǔn)曲線。因?yàn)轭伾珪?huì)隨著時(shí)間的延長不斷加深,并且顯色反應(yīng)的速度和溫度有關(guān),所以除非精確控制顯色反應(yīng)的時(shí)間和溫度,否則如需精確測定宜每次都做標(biāo)準(zhǔn)曲線。

6、 如果沒有酶標(biāo)儀,也可以使用普通的分光光度計(jì)測定,但應(yīng)考慮根據(jù)比色皿的最小檢測體積。應(yīng)按比例適當(dāng)加大雙縮脲試劑的用量使總體積不小于最小檢測體積,樣品和標(biāo)準(zhǔn)品的用量亦相應(yīng)按比例放大。使用分光光度計(jì)測定蛋白濃度時(shí),每個(gè)試劑盒可以測定的樣品數(shù)量可能會(huì)顯著減少。

7、 檢測中發(fā)現(xiàn)所有孔都呈暗紫色,可能原因是樣品含有還原劑,應(yīng)適當(dāng)透析或稀釋樣品。

8、 為了您的安全和健康,請穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。

 

有效期: 6個(gè)月有效。蛋白標(biāo)準(zhǔn)配制成溶液后應(yīng)-20℃凍存。

NobleRyder 雙縮脲蛋白定量試劑盒 

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